← Назад
Б. Среды для морских и солоноватоводных цианобактерий
MNMN (BG-11 на морской воде)
Гибридная среда: биогены BG-11 + природная морская вода
- Применение
- Морские Synechococcus, бентосные морские цианобактерии; основа для среды PRO99 (Prochlorococcus)
- pH
- 7,8–8,2
- Источник
- Rippka et al., 1979; Waterbury et al., 1986
Состав
| Компонент | Количество на 1 л |
|---|---|
| Морская вода (фильтрованная) | 750 мл |
| Дистиллированная вода | 250 мл |
| NaNO₃ | 0,75 г |
| K₂HPO₄·3H₂O | 0,02 г |
| Лимонная кислота | 3 мг |
| Цитрат железа-аммония | 3 мг |
| Na₂ЭДТА | 0,5 мг |
| Na₂CO₃ | 0,02 г |
| Раствор микроэлементов A5 + Co | 1,0 мл |
Раствор микроэлементов A5 + Co
на 100 мл раствора · расход 1 мл на 1 л среды (хватает на 100 л) · хранение 4 °C в тёмном стекле, 12 мес.
| Компонент | Навеска / объём |
|---|---|
| H₃BO₃ | 286 мг |
| MnCl₂·4H₂O | 181 мг |
| ZnSO₄·7H₂O | 22,2 мг |
| Na₂MoO₄·2H₂O | 39,0 мг |
| CuSO₄·5H₂O | 7,9 мг |
| Co(NO₃)₂·6H₂O | 4,94 мг (или 1 мл первичного р-ра 4,94 г/л) |
| Дистиллированная вода | до 100 мл |
Приготовление
Морскую воду профильтровать (0,45 → 0,22 мкм), смешать с дистиллированной водой и автоклавировать ОТДЕЛЬНО. Биогены (нитрат, фосфат, цитраты, ЭДТА, карбонат, A5) приготовить в виде концентрата на 50 мл, стерилизовать фильтрацией и внести в остывшую морскую воду асептически.
Примечания
- Морскую воду перед использованием выдерживают в темноте 2–4 недели («старение») для минерализации растворённой органики, затем фильтруют.
- Автоклавирование морской воды вместе с фосфатом даёт обильный осадок фосфатов кальция и магния — раздельная стерилизация обязательна.
- Разбавление до 75 % (≈ 26 ‰) соответствует условиям прибрежных вод; для океанических штаммов используют неразбавленную морскую воду.
- Соли растворяют по одной, в указанном порядке; H₃BO₃ растворяется медленно — допускается подогрев до 40 °C. Кобальт вносят из первичного раствора: навеску 4,94 мг взвесить на обычных весах невозможно. Первичный раствор Co: 494 мг Co(NO₃)₂·6H₂O в 100 мл воды, взять 1 мл. Без кобальта раствор называется просто «A5». Появление осадка или помутнения — признак негодности.