← Назад
Д. Среды на основе морской воды
WALNEСреда Уолна (Walne / Conway)
Производственная среда для аквакультуры
- Применение
- Массовое культивирование кормовых микроводорослей для моллюсков и креветок: Isochrysis, Chaetoceros, Skeletonema, Tetraselmis
- pH
- 8,0
- Источник
- Walne, 1970; Conway medium
Состав
| Компонент | Количество на 1 л |
|---|---|
| Морская вода | 1000 мл |
| Основной питательный раствор Уолна | 1,0 мл |
| Раствор Na₂SiO₃·9H₂O (4 г на 100 мл) | 2,0 мл (только для диатомовых) |
| Раствор витаминов Уолна | 0,1 мл |
Основной питательный раствор Уолна
на 1 л · расход 1 мл на 1 л среды · хранение 4 °C в тёмном стекле, 6 мес.
| Компонент | Навеска / объём |
|---|---|
| NaNO₃ | 100 г |
| Na₂ЭДТА | 45 г |
| H₃BO₃ | 33,6 г |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 20 г |
| FeCl₃·6H₂O | 1,3 г |
| MnCl₂·4H₂O | 0,36 г |
| Раствор редких металлов Уолна | 1 мл |
| Дистиллированная вода | до 1000 мл |
Раствор редких металлов Уолна
на 100 мл · расход 1 мл на 1 л основного питательного раствора · хранение 4 °C, 12 мес.
| Компонент | Навеска / объём |
|---|---|
| ZnCl₂ | 2,1 г |
| CuSO₄·5H₂O | 2,0 г |
| CoCl₂·6H₂O | 2,0 г |
| (NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O | 0,9 г |
| Дистиллированная вода | до 100 мл |
Раствор витаминов Уолна
на 100 мл · расход 0,1 мл на 1 л среды · хранение −20 °C, 6 мес.
| Компонент | Навеска / объём |
|---|---|
| Тиамин·HCl (B₁) | 200 мг |
| Цианокобаламин (B₁₂) | 10 мг |
| Дистиллированная вода | до 100 мл |
Приготовление
Морскую воду профильтровать и стерилизовать. В остывшую воду внести 1 мл основного питательного раствора, при работе с диатомовыми — 2 мл раствора силиката, затем 0,1 мл раствора витаминов (стерильно, после охлаждения).
Примечания
- Основной раствор объединяет азот, фосфор, железо и часть микроэлементов в одном флаконе — это главное практическое преимущество среды в производственных условиях.
- Раствор редких металлов и раствор витаминов готовят и хранят отдельно от основного раствора.
- В аквакультуре среду часто готовят на неочищенной, но профильтрованной и обработанной УФ морской воде без автоклавирования — при этом дозу основного раствора увеличивают до 2 мл/л.
- Производственный раствор: готовится на литр, так как в аквакультуре среду делают тоннами. Для лаборатории можно готовить 100 мл, уменьшив все навески в десять раз и взяв 0,1 мл раствора редких металлов. Воду подогревают до 40–50 °C и подкисляют 1–2 мл конц. HCl, иначе ЭДТА и борная кислота растворяются неполно. Помутнение или бурый осадок Fe(OH)₃ при хранении — признак негодности.
- Раствор входит не в среду напрямую, а в основной питательный раствор Уолна. При хранении мутнеет; для осветления добавляют 2–3 капли конц. HCl.
- Биотин в классической прописи Уолна отсутствует. Раствор вносят только в остывшую среду и только стерильной фильтрацией.