← Назад
А. Среды для пресноводных цианобактерий
Z8Z8
Среда с низкой ионной силой, близкая по составу к природной воде
- Применение
- Nostoc, Anabaena, Phormidium, Tolypothrix, почвенные и эдафические цианобактерии; коллекции NIVA, SAG
- pH
- 7,0–7,2
- Источник
- Kotai, 1972 (NIVA); Staub, 1961
Состав
| Компонент | Количество на 1 л |
|---|---|
| NaNO₃ | 0,467 г |
| Ca(NO₃)₂·4H₂O | 0,059 г |
| MgSO₄·7H₂O | 0,025 г |
| K₂HPO₄ | 0,031 г |
| Na₂CO₃ | 0,021 г |
| Рабочий раствор Fe-ЭДТА (Z8) | 10 мл |
| Раствор микроэлементов по Гаффрону | 1,0 мл |
| Дистиллированная вода | до 1000 мл |
Раствор Fe-ЭДТА для Z8 — исходный раствор «а» (железо)
на 100 мл · хранение 4 °C в тёмном стекле, 6 мес.
| Компонент | Навеска / объём |
|---|---|
| FeCl₃·6H₂O | 2,8 г |
| 0,1 н. раствор HCl | до 100 мл |
Раствор Fe-ЭДТА для Z8 — исходный раствор «б» (ЭДТА)
на 100 мл · хранение 4 °C, 6 мес.
| Компонент | Навеска / объём |
|---|---|
| Na₂ЭДТА | 3,9 г |
| 0,1 н. раствор NaOH | до 100 мл |
Раствор Fe-ЭДТА для Z8 — рабочий раствор
на 1 л · расход 10 мл на 1 л среды · хранение 4 °C, 3 мес.
| Компонент | Навеска / объём |
|---|---|
| Раствор «а» (FeCl₃) | 10 мл |
| Раствор «б» (Na₂ЭДТА) | 10 мл |
| Дистиллированная вода | до 1000 мл |
Раствор микроэлементов по Гаффрону (Gaffron)
на 100 мл раствора · расход 1 мл на 1 л среды · хранение 4 °C, 12 мес.
| Компонент | Навеска / объём |
|---|---|
| Al₂(SO₄)₃·K₂SO₄·24H₂O | 474 мг |
| H₃BO₃ | 310 мг |
| ZnSO₄·7H₂O | 287 мг |
| MnSO₄·4H₂O | 223 мг |
| NiSO₄(NH₄)₂SO₄·6H₂O | 198 мг |
| Cd(NO₃)₂·4H₂O | 155 мг |
| Co(NO₃)₂·6H₂O | 146 мг |
| CuSO₄·5H₂O | 125 мг |
| KBr | 120 мг |
| (NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O | 88 мг |
| KI | 83 мг |
| Cr(NO₃)₃·9H₂O | 41 мг |
| Na₂WO₄·2H₂O | 33 мг |
| V₂O₅ | 8,9 мг |
| Дистиллированная вода | до 100 мл |
Приготовление
Готовят из двух маточных растворов. Раствор 1 (на 1 л): NaNO₃ 46,7 г + Ca(NO₃)₂·4H₂O 5,9 г + MgSO₄·7H₂O 2,5 г. Раствор 2 (на 1 л): K₂HPO₄ 3,1 г + Na₂CO₃ 2,1 г. В 900 мл воды внести 10 мл раствора 2 → 10 мл рабочего раствора Fe-ЭДТА → 1 мл раствора Гаффрона → в последнюю очередь 10 мл раствора 1 (он содержит кальций) → довести до 1000 мл.
Примечания
- Маточные растворы 1 и 2 хранят строго раздельно: при прямом смешивании концентратов мгновенно выпадает CaCO₃.
- Раствор Fe-ЭДТА готовится в три этапа — два исходных раствора «а» и «б» на кислоте и щёлочи, затем разбавленный рабочий раствор. Это единственный способ получить устойчивый комплекс без выпадения гидроксида железа.
- Безазотный вариант Z8₀ (Z8X): исключают NaNO₃ и Ca(NO₃)₂·4H₂O, вместо нитрата кальция вносят CaCl₂·2H₂O 0,036 г/л (эквимолярная замена по кальцию).
- Низкая ионная сила делает Z8 удобной для выделения штаммов из олиготрофных водоёмов и почвенных проб, где культуры плохо переносят богатую BG-11.
- Готовится на разбавленной соляной кислоте, а не на воде: в нейтральной среде FeCl₃ гидролизуется с выпадением Fe(OH)₃.
- Готовится на разбавленной щёлочи: ЭДТА в кислой среде малорастворима. Растворы «а» и «б» хранят раздельно и никогда не смешивают в концентрированном виде.
- Раствор «а» вливают в воду первым, затем при перемешивании добавляют раствор «б» — комплексообразование идёт в разбавленном растворе без выпадения осадка. Готовый раствор прозрачный, жёлто-соломенный. Появление бурых хлопьев Fe(OH)₃ означает, что раствор непригоден.
- V₂O₅ в воде не растворяется — его предварительно растворяют в 0,2–0,3 мл тёплого 1 М NaOH и лишь затем вносят. KI хранят в темноте: на свету окисляется до I₂, раствор желтеет. Раствор содержит соли кадмия — работать в вытяжном шкафу, отработанные растворы сдавать на утилизацию.