← Артқа
Е. Галофильді және мамандандырылған дақылдарға арналған орталар
BG-11-MODАрнайы міндеттерге арналған BG-11 модификациялары
Базалық ортаның нақты тәжірибелерге арналған нұсқалары
- Қолданылуы
- Синтетикалық биология, липидтердің жинақталуы, Synechocystis пен Synechococcus-те лимиттелуді зерттеу
- pH
- 7,5–8,0
- Дереккөз
- Rippka et al., 1979 негізіндегі жалпыланған тәжірибе
Құрамы
| Компонент | 1 л-ге мөлшері |
|---|---|
| BG-11-дің толық құрамы | А бөлімін қараңыз |
| NaHCO₃ (үрлеусіз C көзі) | 0,84–4,2 г (10–50 мМ) |
| HEPES-NaOH pH 7,5 (буфер) | 2,38 г (10 мМ) |
| Глюкоза (миксотрофия) | 1,0–5,0 г |
| Na₂S₂O₃·5H₂O (тек агар үшін) | 0,3 г |
| A5 + Co микроэлементтер ерітіндісі | 1,0 мл |
| Дистилденген су | 1000 мл-ге дейін |
A5 + Co микроэлементтер ерітіндісі
100 мл ерітіндіге · 1 л ортаға 1 мл шығыны (100 л-ге жетеді) · сақтау 4 °C қараңғы шыныда, 12 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| H₃BO₃ | 286 мг |
| MnCl₂·4H₂O | 181 мг |
| ZnSO₄·7H₂O | 22,2 мг |
| Na₂MoO₄·2H₂O | 39,0 мг |
| CuSO₄·5H₂O | 7,9 мг |
| Co(NO₃)₂·6H₂O | 4,94 мг (немесе 4,94 г/л бастапқы ерітіндіден 1 мл) |
| Дистилденген су | 100 мл-ге дейін |
Дайындау
Базалық BG-11 әдеттегі ретпен дайындалады (кальций — соңғы болып). Бикарбонат пен HEPES автоклавтауға дейін енгізіледі; глюкоза бөлек сүзу арқылы зарарсыздандырылып, суыған ортаға қосылады.
Ескертулер
- Фосфорсыз BG-11 (BG-11 –P): K₂HPO₄-ті алып тастау керек; егіс материалы центрифугалау арқылы екі рет шайылады. Полифосфат түйіршіктерін зерттеу үшін қолданылады.
- Күкіртсіз BG-11 (BG-11 –S): MgSO₄·7H₂O MgCl₂·6H₂O 0,062 г/л-ге ауыстырылады (магний бойынша эквимолярлы); микроэлементтер ерітіндісіндегі сульфаттар тиісті хлоридтермен ауыстырылады.
- Глюкозаны ортамен бірге автоклавтауға БОЛМАЙДЫ: амин топтарымен Майяр реакциясы жүріп, жасушалар үшін улы өнімдер түзіледі; орта қоңырланады.
- Na₂S₂O₃·5H₂O тек агарланған орталарға қосылады — сұйық ортада ол қажет емес әрі өсуді тежеуі мүмкін.
- Тұздар көрсетілген ретпен бір-бірлеп ерітіледі; H₃BO₃ баяу ериді — 40 °C-қа дейін жылытуға болады. Кобальт бастапқы ерітіндіден енгізіледі: 4,94 мг өлшендіні кәдімгі таразыда өлшеу мүмкін емес. Co бастапқы ерітіндісі: 100 мл суда 494 мг Co(NO₃)₂·6H₂O, одан 1 мл алынады. Кобальтсыз ерітінді жай ғана «A5» деп аталады. Тұнба немесе бұлдырлықтың пайда болуы — жарамсыздық белгісі.