Қазақстандық фототрофты микроорганизмдер дақылдарының коллекциясы
← Артқа

В. Arthrospira (Spirulina) және алкалофильді формаларға арналған сілтілі орталар

ZARROUK

Заррук ортасы (Zarrouk)

Спирулинаны өсіруге арналған стандартты орта

Қолданылуы
Arthrospira platensis, A. maxima және басқа алкалофильді әрі галоалкалофильді цианобактериялар
pH
8,5–11,0 (жұмыс оптимумы 9,5–10,0)
Дереккөз
Zarrouk, 1966

Құрамы

Компонент1 л-ге мөлшері
NaHCO₃16,8 г
K₂HPO₄0,5 г
NaNO₃2,5 г
K₂SO₄1,0 г
NaCl1,0 г
MgSO₄·7H₂O0,2 г
CaCl₂ (сусыз)0,04 г (немесе CaCl₂·2H₂O 0,053 г)
FeSO₄·7H₂O0,01 г
Na₂ЭДТА0,08 г
A5 микроэлементтер ерітіндісі1,0 мл
B6 сирек металдар ерітіндісі1,0 мл
Дистилденген су1000 мл-ге дейін

A5 + Co микроэлементтер ерітіндісі

100 мл ерітіндіге · 1 л ортаға 1 мл шығыны (100 л-ге жетеді) · сақтау 4 °C қараңғы шыныда, 12 ай

КомпонентӨлшенді / көлемі
H₃BO₃286 мг
MnCl₂·4H₂O181 мг
ZnSO₄·7H₂O22,2 мг
Na₂MoO₄·2H₂O39,0 мг
CuSO₄·5H₂O7,9 мг
Co(NO₃)₂·6H₂O4,94 мг (немесе 4,94 г/л бастапқы ерітіндіден 1 мл)
Дистилденген су100 мл-ге дейін

B6 сирек металдар ерітіндісі (Заррук бойынша)

100 мл ерітіндіге · 1 л ортаға 1 мл шығыны · сақтау 4 °C, 12 ай

КомпонентӨлшенді / көлемі
K₂Cr₂(SO₄)₄·24H₂O9,6 мг
NiSO₄·7H₂O4,78 мг (4,78 г/л бастапқы ерітіндіден 1 мл)
Co(NO₃)₂·6H₂O4,40 мг (4,40 г/л бастапқы ерітіндіден 1 мл)
Ti₂(SO₄)₃4,00 мг (4,00 г/л бастапқы ерітіндіден 1 мл)
NH₄VO₃2,29 мг (2,29 г/л бастапқы ерітіндіден 1 мл)
Na₂WO₄·2H₂O1,79 мг (1,79 г/л бастапқы ерітіндіден 1 мл)
Дистилденген су100 мл-ге дейін

Дайындау

ЕКІ ерітінді дайындалады. «А» ерітіндісі (500 мл): NaHCO₃ 16,8 г + K₂HPO₄ 0,5 г. «Б» ерітіндісі (500 мл): NaNO₃ → K₂SO₄ → NaCl → MgSO₄·7H₂O → CaCl₂ → FeSO₄ + ЭДТА комплексі → A5-тен 1 мл → B6-дан 1 мл. Екі ерітінді бөлек зарарсыздандырылады және тек бөлме температурасына дейін толық суығаннан кейін ғана қосылады.

Ескертулер

  • КРИТИКАЛЫҚ СӘТ: NaHCO₃ мен CaCl₂-ні концентрацияланған күйде араластыруға болмайды — CaCO₃ лезде тұнбаға түседі. Осыдан «А» және «Б» ерітінділеріне бөлу міндеті туындайды.
  • NaHCO₃ автоклавтау кезінде CO₂ бөле отырып ыдырайды және орта pH 10,5–11-ге дейін сілтіленеді. «А» ерітіндісін 0,22 мкм мембрана арқылы сүзу арқылы зарарсыздандырған жөн; автоклавтағанда мақсатты pH 0,5–1,0 бірлікке төмен белгіленеді.
  • Темір комплексі алдын ала дайындалады: FeSO₄·7H₂O 0,01 г және Na₂ЭДТА 0,08 г (массасы бойынша қатынасы ≈ 1:8) 50 мл суда ерітіліп, тұнбасыз тұрақты сары-сабан түс пайда болғанша 30 мин араластырылады. ЭДТА-сыз темір pH 10 болғанда толығымен Fe(OH)₃ түрінде тұнбаға түседі.
  • Молярлық эквиваленттер: NaHCO₃ — 200 мМ (көміртек пен сілтіліктің басты көзі); NaNO₃ — 29,4 мМ.
  • Жоғары pH өздігінен контаминациядан қорғау қызметін атқарады: pH 9,5-тен жоғары болғанда жасыл микробалдырлар мен бактериялардың басым бөлігі дамымайды — спирулинаны ашық тоғандарда өнеркәсіптік өсіру осыған негізделген.
  • Тұздар көрсетілген ретпен бір-бірлеп ерітіледі; H₃BO₃ баяу ериді — 40 °C-қа дейін жылытуға болады. Кобальт бастапқы ерітіндіден енгізіледі: 4,94 мг өлшендіні кәдімгі таразыда өлшеу мүмкін емес. Co бастапқы ерітіндісі: 100 мл суда 494 мг Co(NO₃)₂·6H₂O, одан 1 мл алынады. Кобальтсыз ерітінді жай ғана «A5» деп аталады. Тұнба немесе бұлдырлықтың пайда болуы — жарамсыздық белгісі.
  • Бастапқы ерітінділер 100 мл-ге дайындалады: г/л-мен көрсетілген концентрация 100 мл-ге он есе аз өлшенді алынатынын білдіреді (мысалы, NH₄VO₃ үшін — 100 мл-ге 229 мг). Ti₂(SO₄)₃ гидролизденеді — дайын ерітінді 0,1 мл конц. H₂SO₄-пен қышқылданады. B6 ерітіндісі міндетті емес: техникалық суда өсіргенде бұл элементтер қоспа түрінде болады.